描述:C0660-122 碘化丙啶(PI)是一種核酸熒光染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但能夠透過死細(xì)胞和凋亡中晚期細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染色。保存條件 保質(zhì)期 -20℃ 12個月
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商更新時間
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+品牌 | CellWorld | 規(guī)格 | 10ml |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 實(shí)驗(yàn) |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
碘化丙啶(PI)溶液(50ug/ml)
產(chǎn)品簡介:
碘化丙啶(PI)是一種核酸熒光染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但能夠透過死細(xì)胞和凋亡中晚期細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染色。因此,PI 作為熒光探針常用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis) 的檢測。在流式細(xì)胞分析中,PI 常與其他染料如Calcein-AM、Hoechst 33258 或Hoechst 33342 聯(lián)合使用,來區(qū)分凋亡早晚期細(xì)胞以及死細(xì)胞。此外,PI 也常作為多色熒光染色的復(fù)染劑使用。
產(chǎn)品描述:
本產(chǎn)品為液體(1X),已經(jīng)過 0.1μm過濾,不含細(xì)菌、支原體等。
規(guī)格:10mL/支
有效期: 12個月
儲存條件:-20℃
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸
使用說明
1. 用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)的檢測,常用于流式細(xì)胞儀分析;
2. 常被用來與 Calcein, AM、Hoechst 33258 或 Hoechst 33342 等一起使用,能同時對活細(xì)胞和死細(xì)胞染色。
操作步驟
操作步驟(僅供參考):
細(xì)胞樣品的制備:
(1) 貼壁細(xì)胞:
① 收集上述細(xì)胞懸液到離心管內(nèi)。
② 4℃離心,使細(xì)胞沉到管底。小心吸取上清并丟棄,可留大約 50ul 培養(yǎng)液,以免吸走細(xì)胞,
③ 加入約1ml 提前預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移至 1.5ml 無菌離心管。
④ 4℃離心,使細(xì)胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丟棄,可留大約 50ulPBS,以免吸走細(xì)胞。
⑥ 輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。
(2) 懸浮細(xì)胞:
① 4℃離心,使細(xì)胞沉到管底。
② 小心吸取上清并丟棄,可留大約 50ul 培養(yǎng)液,以免吸走細(xì)胞。
③ 加入約1ml提前預(yù)冷的 PBS, 重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移至 1.5ml 無菌離心管。
④ 4℃離心,使細(xì)胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丟棄,可留大約 50ul PBS, 以免吸走細(xì)胞。
⑥ 輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。
細(xì)胞的固定:加入1ml冰浴預(yù)冷70%乙醇中,輕輕吹打混勻,4℃條件下
固定2h或更長時間。4C固定 12~24h 可能效果更佳。
(3)細(xì)胞的清洗:
① 4℃離心,使細(xì)胞沉到管底。
② 小心吸取上清并丟棄,可留大約 50 ul 溶液,以免吸走細(xì)胞
③ 加入約1ml 提前預(yù)冷的 PBS,重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移至1.5ml 無菌離心管。
④ 4℃離心,使細(xì)胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丟棄,可留大約 50ul PBS,以免吸走細(xì)胞。
(4)PI染色:在每個待檢細(xì)胞樣品中加入 500ul 配制好的PI染色工作液,輕輕重懸細(xì)胞沉淀,置于37℃避光水浴 30min.
(5)檢測與分析:用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長 488nm 波長處檢測紅色熒光,同時檢測光散射情況。采用適當(dāng)分析軟件進(jìn)行細(xì)胞 DNA或 RNA 含量分析和光散射分析。
注意事項(xiàng)
1、熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測。
2、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
3、在為了獲得細(xì)胞沉淀的離心的過程中,對于特殊細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)提高離心力或延長離心時間。
4、如果用于組織的細(xì)胞周期與細(xì)胞調(diào)亡檢測,則必須把組織消化后,制備成單細(xì)胞懸液,才可以進(jìn)行檢測,
5、可溶于水或 DMSO。本品用 DMSO 溶解,因 DMSO的熔點(diǎn)是 18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。
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